連翹와 金銀花 에탄올 추출물의 항염증 효능 연구
- 주제(키워드) 연교 , 금은화 , 항염증
- 발행기관 동신대학교 대학원
- 지도교수 조성희
- 발행년도 2020
- 학위수여년월 2020. 2
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 대학원 한의학과
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/dsu/200000279807
- UCI I804:46001-200000279807
- 본문언어 한국어
- 저작권 동신대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
초록/요약
초 록 連翹와 金銀花 에탄올 추출물의 항염증 효능 연구 류 효 경 동신대학교 대학원 한의학과 (지도교수 조 성 희) 본 연구의 목적은 염증성 질환에 빈번하게 사용되는 연교(Forsythia viridissima Lindley's fructus, 이하 FVL)와 금은화(Lonicera japonica Thunberg's flos, 이하 LJT)의 에탄올 추출물의 항염증 효능을 연구하는 것이다. 본 연구에서는 FVL과 LJT의 항염증 효능을 알아보기 위해 FVL 또는 LJT 처리를 한 뒤 LPS로 활성화 시킨 Raw264.7 세포에서 염증 관련 물질인 Prostaglandin E2 (PGE2), Nitric oxide (NO), Cyclooxygenase-2 (COX-2), inducible Nitric oxide synthase (iNOS), Interlukine-1β (IL-1β), Interlukine-6 (IL-6), Tumor necrosis factor-α (TNF-α), mitogen-activated protein kinase (MAPK), Inhibitor of kappa B-α (IκBα), Nuclear factor kappa B (NF-κB) 등의 생성량을 확인하였다. 또한 염증 반응에 영향을 주는 항산화 효능을 확인하기 위해 reactive oxygen species (ROS) 및 free radical도 추가로 측정하였다. 항염증 효능 측정 결과, 대조군과 비교하여 FVL 및 LJT 군에서 PGE2, NO, IL-1β, IL-6, TNF-α 생성량과 COX-2 mRNA와 iNOS mRNA의 유전자 발현 양이 감소하였으며 MAPK (ERK, JNK, p38) 경로의 발현이 감소되었다. 또한 IκBα의 발현이 증가하였고 NF-κB가 감소 하였다. FVL과 LJT는 NF-κB를 감소시킴으로써 염증성 유전자의 발현을 조절하고 염증 매개체를 감소시키는 것으로 입증되었다. FVL과 LJT는 또한 항염증 효능에 영향을 미치는 ROS 생성 및 free radical을 감소시키며 항산화 효능을 가짐을 보였다. 결론적으로, 본 실험은 FVL 및 LJT가 다양한 염증성 질환을 치료하는데 사용될 수 있음을 시사한다.
more초록/요약
ABSTRACT Research of the Anti-inflammatory Effects of Forsythiae Fructus and Lonicerae Flos Ethanol Extracts Hyo-Kyung Ryu Dept. of Korean Medicine Graduate School of Dong-Shin University (Directed by Prof. Seong-Hee Cho, K.M.D., Ph. D.) The purpose of this study was to investigate the anti-inflammatory effect of ethanol extracts from Forsythia viridissima Lindley's fructus(FVL) and Lonicera japonica Thunberg's flos(LJT) in vitro, which has been frequently used in inflammatory diseases. In this experiment, the anti-inflammatory effect of FVL and LJT were evaluated by checking the following substances of LPS-activated Raw264.7 cell: Prostaglandin E2 (PGE2), Nitric oxide (NO), Cyclooxygenase-2 (COX-2), inducible Nitric oxide synthase (iNOS), Interlukine-1β (IL-1β), Interlukine-6 (IL-6), Tumor necrosis factor-α (TNF-α), mitogen-activated protein kinase (MAPK), Inhibitor of kappa B-α (IκBα), Nuclear factor kappa B (NF-κB). And additionally measured reactive oxygen species (ROS) and free radicals to check the antioxidant effect of FVL and LJT which affect inflammatory responses. As a result of measuring anti-inflammatory efficacy, PGE2, NO, IL-1β, IL-6, TNF-α production amounts were reduced in the FVL and LJT groups compared with the control group, and decreased the amount of COX-2 mRNA, iNOS mRNA gene expression. Expression of MAPK (ERK, JNK, p38) pathway was decreased. Expression of IκBα was increased and NF-κB was decreased. It is demonstrated that FVL and LJT, by reducing NF-κB, regulate the expression of the inflammatory genes and reduce the inflammatory mediators. FVL and LJT also decreased ROS production and free radicals, which shown to have antioxidant efficacy and influence anti-inflammatory effects. In conclusion, these data suggest that FVL and LJT can be used to treat various inflammatory diseases.
more목차
초록 ⅲ
Ⅰ, 서론 1
Ⅱ. 재료 및 방법 3
1. 재료 3
1) 시료 3
2) 시약 3
3) 기기 3
2. 방법 4
1) 시료 추출 4
2) HPLC 측정 4
3) Raw264.7 세포 배양 4
4) 세포 생존율 측정 5
5) DPPH radical 소거능 측정 5
6) 세포 내 reactive oxygen species (ROS) 생성 측정 5
7) Prostaglandin E2 (PGE2) 생성 측정 6
8) Nitric oxide (NO) 생성 측정 6
9) Real-time PCR analysis (COX-2, iNOS) 6
10) Cytokine (IL-1β, IL-6, TNF-α) 생성 측정 8
11) Western blot 단백질 발현 측정 8
3. 통계처리 9
Ⅲ. 실험 결과 10
1. HPLC 측정 10
1) FVL 10
2) LJT 11
2. 세포 생존율 12
3. 항산화 효능평가 13
1) DPPH radical 소거능 측정 13
4. 세포 내 ROS 측정 14
5. Enzyme-linked immunosorbent assay 15
1) PGE2 15
2) NO 16
6. mRNA 발현 17
1) COX-2 17
2) iNOS 18
7. Cytokine level 19
1) IL-1β 19
2) IL-6 20
3) TNF-α 21
8. Protein expression 22
1) ERK 22
2) JNK 23
3) p38 24
4) IκBα 25
5) NF-κB 26
Ⅳ. 고찰 27
Ⅴ. 결론 34
Referance 35
ABSTRACT 40