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레이저와 전침 결합 치료가 Paclitaxel 유도 이질통 모델의 통증 조절 및 대사체 변화에 미치는 영향

Analgesic Effects and Metabolome Analyses of Laser and Electroacupuncture Combined Therapies in Paclitaxel-Induced Allodynia Model

초록/요약

Objectives : 본 연구는 paclitaxel로 유도된 이질통 백서 모델에서 일반침(MA), 전침(EA), 레이저침(LA) 및 결합 치료(LA+EA) 각각의 치료 효과 및 기전을 조사하고자 하였다. Methods : Paclitaxel(2 mg/kg)의 복강 주사로 이질통 동물 모델을 유도하였다. MA, EA, 650 nm LA, 830 nm LA, 650 nm LA+EA 및 830 nm LA+EA의 통증 감소 효과를 평가하기 위해 plantar withdrawal response와 mRNA 및 단백 발현, 면역조직화학 소견 및 대사체 변화를 분석하였다. Results : MA, EA, 650 nm LA, 830 nm LA의 진통 효과를 확인하였으나, 뉴런 재생 및 장내 미생물군 변화의 증거는 없었다. 650 nm LA+EA 결합 치료는 통증 감소와 mTOR, CB1R, FAAH, c-Fos, NeuN, Synapsin I 및 MAP2와 같은 내인자 발현을 나타내는 데 가장 효과적이었다. 830 nm LA+EA 결합 치료는 paclitaxel 주입에 의해 유발된 세포자멸사로 인한 손상 후 수복 및 재생에 가장 효과적이었고 장내 미생물군 변화에도 영향을 미쳤다. Conclusions : 본 연구를 통해 레이저와 전침 결합 치료의 이질통 억제와 신경세포 분열 및 뉴런의 재생 촉진을 확인하였다.

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초록/요약

Objectives : The purpose of this study was to investigate the therapeutic effect and mechanism of manual acupuncture(MA), electroacupuncture(EA), the laser acupuncture(LA) and the combined therapy(LA+EA) in a paclitaxel-induced allodynia rat model. Methods : Allodynia rat model was induced by intraperitoneal injection of paclitaxel(2 mg/kg). In order to assess the reducing pain effects of MA, EA, the 650 nm LA, 830 nm LA, 650 nm LA+EA and 830 nm LA+EA, the plantar withdrawal responses, immunohistochemistry findings, mRNA and protein expressions and metabolome changes were analyzed. Results : The analgesic effects of MA, EA, 650 nm LA, and 830 nm LA were confirmed, but there was no evidence of neuronal regeneration or metabolome changes. 650 nm LA+EA therapy was most effective in reducing pain and in presenting levels of endofactors like mTOR, CB1R, FAAH, c-Fos, NeuN, Synapsin I and MAP2. 830 nm LA+EA therapy was most effective in repair and regeneration after getting damages caused by apoptosis induced by injection of paclitaxel and also affects metabolome changes in caecum stool. Conclusions : This study shows that laser and electroacupuncture combined therapy can suppress allodynia and promote nerve cell division and neuronal regeneration.

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목차

표 목차 ⅲ
그림 목차 ⅳ
초록 ⅵ

Ⅰ. 서론 1

Ⅱ. 재료 및 방법 3
1. 실험 재료 3
1) 실험 동물 3
2. 실험 방법 3
1) 군 분리 3
2) 신경병증성 이질통 유발 및 치료 3
3) Dynamic Plantar Aesthesiometer 측정 4
4) 조직학적 검사 5
5) RNA의 분리와 역전사 중합연쇄(RT-PCR) 6
6) Western blot 7
7) 대사체 분석 7
3. 통계 분석 8

Ⅲ. 실험 결과 9
1. Plantar withdrawal response로 측정한 analgesic 효과 9
1) Reaction time 변화 9
2) Force intensity 변화 11
2. Weight gain에 미치는 영향 13
3. mRNA CB1R, FAAH expression에 미치는 영향 15
1) mRNA CB1R expression 15
2) mRNA FAAH expression 15
4. Protein expression에 미치는 영향 17
1) c-Fos protein expression 17
2) CB1R protein expression 18
3) FAAH protein expression 18
4) NeuN protein expression 18
5) Synapsin I protein expression 18
6) MAP2 protein expression 19
5. Brain DLPAG의 CB1R, mTOR IHC 발현 20
1) mTOR 20
2) CB1R 20
6. 대사체 분석에 미치는 영향 22
1) 침 치료 방법에 따른 대사산물 분석 22
2) 정상군과 대조군 간의 대사산물 분석 23
3) 대조군과 MA군 간의 대사산물 분석 24
4) 대조군과 EA군 간의 대사산물 분석 25
5) 대조군과 650LA군 간의 대사산물 분석 26
6) 대조군과 830LA군 간의 대사산물 분석 27
7) 대조군과 650LA+EA군 간의 대사산물 분석 28
8) 대조군과 830LA+EA군 간의 대사산물 분석 29
9) 정상군, 대조군 및 830LA+EA군 간의 대사산물 분석 30

Ⅳ. 고찰 31
Ⅴ. 결론 39

참고문헌 41
ABSTRACT 46
감사의 글 47

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